人 β- - 連環蛋白（ β- - catenin ）酶聯免疫分析（ELISA

點擊次數：425 發布時間：2019/7/17 16:53:46

· 上傳者：上海信帆生物科技有限公司

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· 資料簡介：本試劑僅供研究使用目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關
液體樣本中β-連環蛋白（β-catenin）含量。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人β-連環蛋白（β-catenin）水平。用純化的
人β-連環蛋白（β-catenin）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加
入β-連環蛋白（β-catenin），再與 HRP 標記的羊抗鼠抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體
復合物，經過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸
的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β-連環蛋白（β-catenin）呈正相關。
用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算樣品中人β-連環蛋白（β
-catenin）濃度。
試劑盒組成：
試劑盒組成 48 孔配置 96 孔配置保存
說明書 1 份 1 份
封板膜 2 片（48） 2 片（96）
密封袋 1 個 1 個
酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標準品：450pg/ml 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存
標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存
酶標試劑 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
顯色劑 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1 瓶 6ml×1 瓶 2-8℃保存
20 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 30ml×1 瓶 2-8℃保存
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固 10-20 分鐘，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上
清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合 10-20 分鐘后，離心
20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次
離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清，保存過程
中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/
分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用 PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞
濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心 20 分
2
鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備
用。標本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或勻漿器
將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待
檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上
進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。