褪黑素（Melatonin MT），是松果體分泌的一種吲哚胺類激素，分子量為232.3 De, 其主要生物學作用：（1）傳遞光暗信號，使生物的各種內源性節律與環境周期保持同步；（2）有效清除生物體內的自由基，使機體免受氧化損傷；（3）褪黑素與鈣調蛋白結合，調節細胞骨架的機能狀態，以執行特定的機能；（4）具有鎮痛、鎮靜、催眠及調節神經系統、內分泌系統、保護消化道，促進睡眠和毛皮生長的激素。

主要應用范圍：

* 抗衰老、抗癌癥作用的機制研究；

* 心腦血管、神經系統、內分泌系統疾病方面的研究；

* 免疫功能、生物節律方面研究的參考；

* 生長發育、性功能和許多器管起調節作用的指標。

試劑盒組成：

１、緩沖液1瓶；

２、褪黑素標準（凍干品）5瓶；10，50，100，200，400pg/ml

３、 ¹²⁵I-褪黑素2瓶；

４、褪黑素抗血清2瓶；

５、分離劑1瓶；

樣品收集：取靜脈血2ml ，注入試管中待凝固后，分離血清，-20℃保存2個月。測定前置室溫或冷水中復融，混勻后，4℃ 3000rpm/ min離心5 min，取上清測定。

測定方法： 本實驗采用平衡法，取聚苯乙烯試管編號，按下表操作：

MT RIA加液程序（單位： ul ）

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試劑 T NSB B₀ S₁~S8 樣品

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緩沖液 —— 100 100 —— ——

標準品 —— —— —— 100 ——

樣品 —— —— —— —— 100

抗體 —— —— 100 100 100

¹²⁵I-MT 100 100 100 100 100

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充分混勻，室溫放置1小時，置4℃冰箱過夜。

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分離劑 —— 500 500 500 500

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振蕩混勻后，4℃冰箱放置1小時，4℃，4000 轉/分離心45 min，棄上清液，測沉淀cpm數。

結果計算：

以N/T、B/T計算NBS、S₀結合百分率，以B/B₀計算標準及待測樣品結合百分率，在半對數坐標紙上繪制標準曲線，并查出樣品值?；蛴勺詣?/font>γ計數器預先編制程序，直接給出有關參數，標準曲線及樣品濃度。

注意事項：

本月標準品每瓶用 ml緩沖液稀釋

本月藥盒抗體每瓶用 ml緩沖液稀釋

本月藥盒標記每瓶用 ml緩沖液稀釋

本月藥盒有效期為一個月，分離劑在使用前充分混勻（不可冰凍）

正常值：正常人空腹46.1±11.2pg/ml(X±SD).

本藥盒主要技術參數：

1、NSB<5%

2、標準范圍：0-400 pg/ml

3、靈敏度：<0.5pg/ml

4、精密度：批內變異系數：CVw<4.5 %,

5、批間變異系數：CVw <8.5%

6、平均回收率:97.5%

7、正常參考值：各實驗室應根據自己的條件建立自己的正常對照組。

46.1±11.2pg/ml(n=188)。

有效日期：1個月

褪黑素放射免疫試劑盒操作說明書

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