聯 系 人：莫經理
電 話：4008-013-053
手 機：13764793648
地 址：上海市閔行區顧戴路2988號7樓
郵 編：200000
傳 真：021-51870610
郵 箱：1170233632@qq.com
阿儀網商鋪：http://www.app17.com/c85413/
手機網站：m.shxfbio.com
價格：電議 型號：
原產地：中國大陸發布時間：2014/10/26 20:56:24
采購度：574
本產品僅供科研實驗，不得用于醫療或食用。
| 兔腫瘤壞死因子α(TNF-α) elisa試劑盒 | |||
| 本試劑盒用于測定血清，血漿及相關液體樣本中兔腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量。 | |||
| ELISA技術原理：以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來 | |||
| 1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。 | |||
| 2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。 | |||
| 3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。 | |||
| 4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記 的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。 | |||
| 5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。 | |||
| 6. 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水 平），并且重復性好。 | |||
| 樣本處理及要求： | |||
| 1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。 | |||
| 2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。 | |||
| 3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。 | |||
| 4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。 | |||
| 5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。 | |||
| 6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融. | |||
| 7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 | |||
| 操作步驟 | |||
| 1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在、第二孔中分別加標準品100μl，然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為30ng/L，20ng/L ，10ng/L，5ng/L， 2.5ng/L）。 | |||
| 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 | |||
| 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 | |||
| 4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。 | |||
| 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 | |||
| 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 | |||
| 7. 溫育：操作同3。 | |||
| 8. 洗滌：操作同5。 | |||
| 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. | |||
| 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 | |||
| 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 | |||
| 注意事項： | |||
| 1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。 | |||
| 2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。 | |||
| 3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。 | |||
| 4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數（×n×5）。 | |||
| 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 | |||
| 6． 底物請避光保存。 | |||
| 7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準. | |||
| 8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 | |||
| 9． 本試劑不同批號組分不得混用。 | |||
| 10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。 |
更新時間：2023/11/7 12:13:17
| 您感興趣的產品* | 您還沒有輸入您感興趣的產品 | |
| 您的單位* | 您還沒有輸入您的單位 | |
| 聯系人* | 您還沒有輸入聯系人 | |
| 聯系電話* | 您還沒有輸入聯系電話 | |
| 詳細地址 | ||
| 常用郵箱 | 您輸入的郵箱格式不正確 | |
| 請輸入您對我們的意見或建議* | 您還沒有輸入您對我們的意見或建議 | |
| 驗證碼* | 您還沒有輸入驗證碼 |
溫馨提示
1.遵守中華人民共和國有關法律、法規，尊重網上道德，承擔一切因您的行為而直接或間接引起的法律責任。
2.請您真實的反映產品的情況,不要捏造、誣蔑、造謠。如對產品有任何疑問,也可以留言咨詢。
3.未經本站同意，任何人不得利用本留言簿發布個人或團體的具有廣告性質的信息或類似言論。
總訪問量：4448235 
