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點擊次數：562 發布時間：2021/6/3 15:55:43
· 上 傳 者： 上海信帆生物科技有限公司
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· 所屬分類：應用方法
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· 資料簡介： 組織總磷含量檢測試劑盒說明書 可見分光光度法 注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。 規格：50T/48S 產品內容： 試劑一：液體 10mL×1 瓶，4℃保存（強腐蝕性，強氧化性）。 試劑二：液體 11 mL×1 瓶，4℃保存。 試劑三：粉劑×2 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入 10 mL 蒸餾水，溶解后再加入 5 mL 試 劑二，混勻。 標準品：液體 1mL×1 支，1mmol/L 無機磷標準液，4℃保存。 產品說明： 磷的存在形態包括無機磷與有機磷。無機磷主要指磷酸根，參與生物體內多種代謝，包括能量 代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化等。通過測定總磷與無機磷含量即可了解作物對磷的利 用率，進而為合理施肥提供依據。 總磷經消化后，轉化成無機磷。鉬藍法是測定無機磷含量的經典方法，一定條件下，鉬藍與磷 酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物質，通過測定 660nm 光吸收，即可計算無機磷含量，進而可計 算出組織中總磷含量。 自備儀器和用品： 可見分光光度計、離心機、水浴鍋、可調式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水和濃硫酸。 操作步驟： 一、有機磷消化： 取帶蓋試管，進入精確稱取約 0.1 g 組織，加濃硫酸 1.0 mL，蓋緊（防止水分散失）后沸水浴 10min 左右，待溶液呈黑色或棕色時取出。稍冷后，加試劑一 200μL，充分混勻，蓋緊后繼續沸水 浴，直到溶液呈透明狀，取出室溫冷卻后，加蒸餾水 3.8 mL，充分混勻；室溫，10000rpm，離心 10min，取上清液，待測。 二、測定： 1. 分光光度計預熱 30 min 以上，調節波長到 660 nm，蒸餾水調零。 2.打開水浴鍋，調節溫度到 40℃。 3.測定： 試劑名稱（μL） 空白管 標準管 測定管 標準液 50 上清液 50 蒸餾水 500 450 450 試劑三 500 500 500
混勻后置于 40℃水浴保溫 10min，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，分別記為 A 空白 管、A 標準管、A 測定管。 三、組織總磷含量計算： 總磷含量(mmol /g FW)= [C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]×V 總÷W =0.005×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)÷W C 標準液：1 mmol/L；V 總：上清液總體積，5 mL=0.005 L。W：樣品質量，g。 注意事項： 1、試劑三需臨用前配制，限當天使用。 2、測定前先用 1~2 個樣品做預實驗，如吸光值大于 0.8，需用蒸餾水做相應稀釋。
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